Handhabung von Polymerstandards
Lagerung von Polymerstandards
Lagern Sie Ihre Standards dicht verschlossen an einemdunklen kühlen Ort, ggf. im Kühlschrank (4°C). Bewahren Sie Ihre Standards trocken auf. Dies erhöhtdie Lebenszeit.
Bitte lagern Sie Ihre Standards nicht im Sonnenlicht (Fensterbank oder Regal in der Nähe eines Fensters), um einen Abbau Ihrer Proben zu vermeiden. Besonders empfindlich sind temperatur- und lichtempfindliche Standards wie Poly(isopren) oder Poly(butadien).
Setzen Sie Lösungen frisch an und brauchen Sie diese schnell auf. Kurzfristig können fertige Lösungen imKühlschrank aufbewahrt werden. Fertig angesetzte Standardlösungen dürfen nicht eingefroren werden; ein Einfrieren kann zur Zerstörung der Polymeren führen.
Probenpräparation zur GPC/SEC-Analyse
- Stellen Sie stets frische Standardlösungen her. Exakte Konzentrationen sind unabdingbar bei der Verwendung von Lichtstreu-, Viskosimetrie- oder Mehrfachdetektions-Systemen.
- Wählen Sie geeignete saubere Behälter(Autosamplerfläschchen, Flaschen, Kolben, etc.).
- Wiegen Sie die korrekte Menge Standard auf einer Analysenwaage in den Behälter ein. Basierend auf Detektortyp und Anzahl der verwendeten Säulen wählen Sie Ihre Probenmenge.
- Standardmischungen:
Es ist möglich, bis zu vier engverteilte Standards des selben Typs in einem Behälter zu lösen. Um eine Koelution zu vermeiden, achten Sie bei einer Standardmischung darauf, dass sich die Molmassen der Standards mindestens um eine Molmassendekade unterscheiden; z. B. Polystyrol 5 000 Da, 50 000 Da, 500 000 Da. - PSS bietet vorgefertigte Mischungen oder Kits an, die Koelution vermeiden (ReadyCal-Kits).
Empfohlene Probenkonzentration
| Molmassenbereich [Da] | Konzentration [g/l] oder [mg/ml] |
|---|---|
| 100 - 10 000 | 1 bis 2 |
| 10 000 - 100 000 | 1 bis 2 |
| 100 000 - 500 000 | 1 bis 2 |
| 500 000 - 1 000 000 | 1 bis 2 |
| 1 000 000 und höher | 0.5 oder weniger |
| breite Standards | 4.0 - 5.0 mg/ml |
- Wenn Sie einen internen Standard verwenden wollen, mischen Sie diesen in einem separaten Gefäß mit Ihrer mobilen Phase. Benutzen Sie diese Mischung, um Ihre Proben und Standards anschließend zu lösen. Der interne Standard muss niedermolekular und monodispers sein und nach der Trennschwelle eluieren. Stellen Sie die gewünschte Probenkonzentration durch genaue Zugabe der Lösungsmittelmenge her.
- Verschließen Sie den Behälter mit der angesetzten Lösung und lassen Sie ihn bis zum vollständigen Lösen der Proben stehen. Polymere mit Mw < 200 000 Da benötigen 3 - 4 Stunden zum Lösen. Das Lösen von Substanzen > 2 000 000 Da kann zwischen 1 - 3 Tage dauern.
- Schwenken Sie die Fläschchen vorsichtig, um die Lösung zu homogenisieren. Verwenden Sie keine Magnetrührer, Ultraschallbäder, Mikrowellen und vermeiden Sie kräftiges Schütteln, da hierdurch die Polymere zerstört werden können.
- Injizieren Sie jede Lösung separat. Orientieren Siesich an den Angaben in der Tabelle, um Ihr optimales Injektionsvolumen zu finden.
Empfohlenes Injektionsvolumen
| Anzahl Säulen (Länge 30 cm, ID 8 mm) | Injektvolumen [µl] |
|---|---|
| 4 - 5 und mehr | 200 bis 250 |
| 3 | 100 |
| 2 | 50 |
| 1 | 20 |
- Für hochmolekulare Proben (Mw > 1 000 000 Da) wird empfohlen, Säulen mit großen Partikeln (10 µm, 20 µm) und Porositäten zu verwenden. Arbeiten Sie in diesem Fall auch bei reduzierten Flussraten (0.5 - 0.3 ml/min), kleinen Konzentrationen und ggf. größeren Injektvolumina. Dieses vermindert den möglichen Polymerabbau.
Beispiel: Injizieren Sie 100 µl einer Lösung von 0.1 g/l anstelle von 20 µl einer Lösung von 0.5 g/l. - Erstellen Sie die Kalibrierkurve aus den Mp-Wertender vermessenen Standards.